1. Formål: Denne prosedyren tar sikte på å gi en standardisert prosedyre for aseptiske operasjoner og beskyttelse av sterile rom.
2. Anvendelsesområde: biologisk testlaboratorium
3. Ansvarlig person: QC Supervisor Tester
4.Definisjon: Ingen
5. Sikkerhetstiltak
Utfør strengt aseptiske operasjoner for å forhindre mikrobiell forurensning;Operatører bør slå av UV-lampen før de går inn i sterilt rom.
6. Prosedyrer
6.1.Sterilt rom bør utstyres med sterilt operasjonsrom og bufferrom.Rensligheten i det sterile operasjonsrommet bør nå klasse 10000. Innetemperaturen bør holdes på 20-24°C og luftfuktigheten bør holdes på 45-60%.Rensligheten til den rene benken skal nå klasse 100.
6.2.Sterilt rom bør holdes rent, og det er strengt forbudt å samle opp rusk for å forhindre forurensning.
6.3.Forebygg strengt kontaminering av alt steriliseringsutstyr og kulturmedier.De som er forurenset bør slutte å bruke dem.
6.4.Sterile rom bør være utstyrt med desinfeksjonsmidler med arbeidskonsentrasjon, som 5 % kresolløsning, 70 % alkohol, 0,1 % klormetioninløsning, etc.
6.5.Sterile rom bør regelmessig steriliseres og rengjøres med passende desinfeksjonsmiddel for å sikre at rensligheten i det sterile rommet oppfyller kravene.
6.6.Alle instrumenter, instrumenter, tallerkener og andre gjenstander som må bringes inn i et sterilt rom, bør pakkes tett inn og steriliseres med passende metoder.
6.7.Før de går inn i sterilt rom, må personalet vaske hendene med såpe eller desinfeksjonsmiddel, og deretter bytte til spesielle arbeidsklær, sko, luer, masker og hansker i bufferrom (eller tørke av hendene igjen med 70 % etanol) før de går inn i sterilt rom.Utfør operasjoner i bakteriekammer.
6.8.Før bruk av sterilt rom, må den ultrafiolette lampen i sterilt rom være slått på for bestråling og sterilisering i mer enn 30 minutter, og den rene benken må slås på for luftblåsing samtidig.Etter at operasjonen er fullført, skal det sterile rommet rengjøres i tide og deretter steriliseres med ultrafiolett lys i 20 minutter.
6.9.Før inspeksjon skal den ytre emballasjen til testprøven holdes intakt og må ikke åpnes for å forhindre kontaminering.Før inspeksjon, bruk 70% alkohol bomullsdotter for å desinfisere den ytre overflaten.
6.10.Under hver operasjon bør en negativ kontroll utføres for å kontrollere påliteligheten til aseptisk drift.
6.11.Ved oppsuging av bakterievæske må du bruke en sugekule for å absorbere den.Ikke berør sugerøret direkte med munnen.
6.12.Inokulasjonsnålen må steriliseres ved flamme før og etter hver bruk.Etter avkjøling kan kulturen inokuleres.
6.13.Sugerørene, reagensrørene, petriskålene og andre redskaper som inneholder bakterievæske bør bløtlegges i en steriliseringsbøtte som inneholder 5 % Lysol-løsning for desinfeksjon, og tas ut og skylles etter 24 timer.
6.14.Hvis det er sølt bakterievæske på bordet eller gulvet, bør du umiddelbart helle 5 % karbonsyreløsning eller 3 % Lysol på det forurensede området i minst 30 minutter før du behandler det.Når arbeidsklær og hatter er forurenset med bakterievæske, bør de umiddelbart tas av og vaskes etter høytrykksdampsterilisering.
6.15.Alle gjenstander som inneholder levende bakterier må desinfiseres før de skylles under springen.Det er strengt forbudt å forurense kloakken.
6.16.Antall kolonier i sterilt rom bør kontrolleres månedlig.Med den rene benken åpen, ta et antall sterile petriskåler med en indre diameter på 90 mm, og injiser aseptisk ca. 15 ml næringsagarkulturmedium som er smeltet og avkjølt til ca. 45°C.Etter størkning, plasser den opp ned ved 30 til 35°C Inkuber i 48 timer i en ℃ inkubator.Etter å ha bevist sterilitet, ta 3 til 5 plater og plasser dem til venstre, midten og høyre for arbeidsposisjonen.Etter å ha åpnet dekselet og eksponert dem i 30 minutter, plasser dem opp ned i en 30 til 35°C inkubator i 48 timer og ta dem ut.undersøke.Gjennomsnittlig antall diverse bakterier på platen i et klasse 100 rent område skal ikke overstige 1 koloni, og gjennomsnittlig antall i et klasse 10000 renrom skal ikke overstige 3 kolonier.Hvis grensen overskrides, bør det sterile rommet desinfiseres grundig inntil gjentatte inspeksjoner oppfyller kravene.
7. Se kapittelet (Sterilitetsinspeksjonsmetode) i "Drug Hygienic Inspection Methods" og "China Standard Operating Practices for Drug Inspection".
8. Distribusjonsavdeling: Avdeling for kvalitetsstyring
Teknisk veiledning for rent rom:
Etter å ha oppnådd et sterilt miljø og sterile materialer, må vi opprettholde en steril tilstand for å studere en spesifikk kjent mikroorganisme eller utnytte funksjonene deres.Ellers kan ulike mikroorganismer utenfra lett blande seg inn. Fenomenet med blanding av irrelevante mikroorganismer utenfra kalles i mikrobiologien forurensende bakterier.Forebygging av kontaminering er en kritisk teknikk i mikrobiologisk arbeid.Fullstendig sterilisering på den ene siden og forebygging av kontaminering på den andre er to aspekter ved aseptisk teknikk.I tillegg må vi forhindre at mikroorganismene som studeres, spesielt patogene mikroorganismer eller genmanipulerte mikroorganismer som ikke finnes i naturen, slipper ut fra våre eksperimentelle beholdere til ytre miljø.For disse formålene, i mikrobiologi, er det mange tiltak.
Sterilt rom er vanligvis et lite rom spesielt satt opp i mikrobiologilaboratoriet.Kan bygges med plater og glass.Arealet skal ikke være for stort, ca 4-5 kvadratmeter, og høyden skal være ca 2,5 meter.Et bufferrom bør settes opp utenfor sterilt rom.Døren til bufferrommet og døren til det sterile rommet bør ikke vende samme retning for å forhindre at luftstrømmen bringer inn diverse bakterier.Både sterilt rom og bufferrom skal være lufttette.Innendørs ventilasjonsutstyr skal ha luftfiltreringsanordninger.Gulvet og veggene i det sterile rommet skal være glatte, vanskelige å inneholde skitt og lette å rengjøre.Arbeidsflaten skal være jevn.Både sterilt rom og bufferrom er utstyrt med ultrafiolett lys.De ultrafiolette lysene i sterilt rom er 1 meter unna arbeidsflaten.Personale som kommer inn i sterilt rom bør ha på seg steriliserte klær og hatter.
For tiden eksisterer sterile rom for det meste i mikrobiologifabrikker, mens generelle laboratorier bruker ren benk.Hovedfunksjonen til den rene benken er å bruke laminær luftstrømsanordning for å fjerne forskjellige små støv inkludert mikroorganismer på arbeidsflaten.Den elektriske enheten lar luft passere gjennom hepa-filteret og deretter inn på arbeidsflaten, slik at arbeidsflaten alltid holdes under kontroll av rennende steril luft.Dessuten er det en høyhastighets luftgardin på siden nær utsiden for å hindre ekstern bakteriell luft i å komme inn.
På steder med vanskelige forhold kan sterile trekasser også brukes i stedet for ren benk.Den sterile boksen har en enkel struktur og er lett å flytte.Det er to hull foran på boksen, som er blokkert av push-pull-dører når de ikke er i drift.Du kan strekke armene inn under operasjonen.Den øvre delen av fronten er utstyrt med glass for å lette innvendig betjening.Det er en ultrafiolett lampe i boksen, og redskaper og bakterier kan settes inn gjennom en liten dør på siden.
Aseptiske operasjonsteknikker spiller for tiden ikke bare en sentral rolle i mikrobiologisk forskning og applikasjoner, men er også mye brukt i mange bioteknologier.For eksempel transgen teknologi, monoklonal antistoffteknologi, etc.
Innleggstid: Mar-06-2024