1. Formål: Denne prosedyren har som mål å tilby en standardisert prosedyre for aseptiske operasjoner og beskyttelse av sterile rom.
2. Anvendelsesområde: biologisk testlaboratorium
3. Ansvarlig person: Kvalitetskontrollør
4. Definisjon: Ingen
5. Sikkerhetsregler
Utfør strengt aseptiske operasjoner for å forhindre mikrobiell kontaminering; operatører bør slå av UV-lampen før de går inn i det sterile rommet.
6. Prosedyrer
6.1. Sterile rom bør være utstyrt med et sterilt operasjonsrom og et bufferrom. Renholdet i det sterile operasjonsrommet bør nå klasse 10000. Innetemperaturen bør opprettholdes på 20–24 °C og luftfuktigheten bør opprettholdes på 45–60 %. Renholdet på den rene benken bør nå klasse 100.
6.2. Sterile rom skal holdes rene, og det er strengt forbudt å hope opp avfall for å forhindre kontaminering.
6.3. Unngå strengt kontaminering av alt steriliseringsutstyr og kulturmedier. De som er kontaminert, bør slutte å bruke dem.
6.4. Sterile rom bør være utstyrt med desinfeksjonsmidler i arbeidskonsentrasjon, som 5 % kresolløsning, 70 % alkohol, 0,1 % klormetioninløsning, osv.
6.5. Sterile rom bør steriliseres regelmessig og rengjøres med egnet desinfeksjonsmiddel for å sikre at renholdet i sterilrommet oppfyller kravene.
6.6. Alle instrumenter, beholdere, skåler og andre gjenstander som må bringes inn i sterilrommet, skal være tett innpakket og sterilisert med passende metoder.
6.7. Før de går inn i sterilrommet, må personalet vaske hendene med såpe eller desinfeksjonsmiddel, og deretter skifte til spesielle arbeidsklær, sko, hatter, masker og hansker i bufferrommet (eller tørke hendene igjen med 70 % etanol) før de går inn i sterilrommet. Utfør operasjonene i bakteriekammeret.
6.8. Før bruk av sterilt rom må ultrafiolettlampen i det sterile rommet være slått på for bestråling og sterilisering i mer enn 30 minutter, og renbenken må være slått på for luftblåsing samtidig. Etter at operasjonen er fullført, bør det sterile rommet rengjøres i tide og deretter steriliseres med ultrafiolett lys i 20 minutter.
6.9. Før inspeksjon skal den ytre emballasjen til testprøven holdes intakt og må ikke åpnes for å forhindre kontaminering. Før inspeksjon, bruk bomullsdotter med 70 % alkohol til å desinfisere den ytre overflaten.
6.10. Under hver operasjon bør det utføres en negativ kontroll for å kontrollere påliteligheten til den aseptiske driften.
6.11. Når du absorberer bakterievæske, må du bruke en sugekule til å absorbere den. Ikke berør sugerøret direkte med munnen.
6.12. Inokuleringsnålen må steriliseres med flamme før og etter hver bruk. Etter avkjøling kan kulturen inokuleres.
6.13. Sugerør, reagensrør, petriskåler og annet redskap som inneholder bakterievæske bør legges i bløt i en steriliseringsbøtte med 5 % lysolløsning for desinfeksjon, og tas ut og skylles etter 24 timer.
6.14. Hvis det søles bakterievæske på et bord eller gulv, bør du umiddelbart helle 5 % karbolsyreløsning eller 3 % lysol på det forurensede området i minst 30 minutter før du behandler det. Når arbeidsklær og hatter er forurenset med bakterievæske, bør de tas av umiddelbart og vaskes etter høytrykksdampsterilisering.
6.15. Alle gjenstander som inneholder levende bakterier må desinfiseres før de skylles under springen. Det er strengt forbudt å forurense kloakken.
6.16. Antall kolonier i det sterile rommet bør kontrolleres månedlig. Med den rene benken åpen, ta et antall sterile petriskåler med en indre diameter på 90 mm, og injiser aseptisk ca. 15 ml næringsagarkulturmedium som er smeltet og avkjølt til ca. 45 °C. Etter størkning, plasser dem opp ned ved 30 til 35 °C. Inkuber i 48 timer i en inkubator på ℃. Etter å ha bekreftet sterilitet, ta 3 til 5 plater og plasser dem til venstre, midten og høyre for arbeidsposisjonen. Etter å ha åpnet lokket og eksponert dem i 30 minutter, plasser dem opp ned i en inkubator på 30 til 35 °C i 48 timer og ta dem ut. Undersøk. Gjennomsnittlig antall diverse bakterier på platen i et rent område i klasse 100 skal ikke overstige 1 koloni, og gjennomsnittlig antall i et rent rom i klasse 10 000 skal ikke overstige 3 kolonier. Hvis grensen overskrides, bør det sterile rommet desinfiseres grundig inntil gjentatte inspeksjoner oppfyller kravene.
7. Se kapittelet (Sterilitetsinspeksjonsmetode) i «Metoder for legemiddelhygienisk inspeksjon» og «Kinas standard driftspraksis for legemiddelinspeksjon».
8. Distribusjonsavdeling: Kvalitetsstyringsavdeling
Teknisk veiledning for renrom:
Etter å ha oppnådd et sterilt miljø og sterile materialer, må vi opprettholde en steril tilstand for å kunne studere en spesifikk kjent mikroorganisme eller utnytte funksjonene deres. Ellers kan forskjellige mikroorganismer utenfra lett blandes inn. Fenomenet med blanding av irrelevante mikroorganismer utenfra kalles forurensende bakterier i mikrobiologi. Å forhindre forurensning er en kritisk teknikk i mikrobiologisk arbeid. Fullstendig sterilisering på den ene siden og forebygging av forurensning på den andre er to aspekter ved aseptisk teknikk. I tillegg må vi forhindre at mikroorganismene som studeres, spesielt patogene mikroorganismer eller genmodifiserte mikroorganismer som ikke finnes i naturen, slipper ut fra våre eksperimentelle beholdere til det ytre miljøet. For disse formålene finnes det mange tiltak i mikrobiologi.
Et sterilt rom er vanligvis et lite rom spesielt innredet i et mikrobiologisk laboratorium. Det kan bygges med plater og glass. Området bør ikke være for stort, omtrent 4–5 kvadratmeter, og høyden bør være omtrent 2,5 meter. Det bør settes opp et bufferrom utenfor sterilrommet. Døren til bufferrommet og døren til sterilrommet bør ikke vende i samme retning for å hindre at luftstrømmen bringer inn diverse bakterier. Både sterilrommet og bufferrommet må være lufttette. Innendørs ventilasjonsutstyr må ha luftfiltreringsenheter. Gulvet og veggene i sterilrommet må være glatte, vanskelige å holde på med smuss og lette å rengjøre. Arbeidsflaten bør være jevn. Både sterilrommet og bufferrommet er utstyrt med ultrafiolett lys. De ultrafiolette lysene i sterilrommet er 1 meter unna arbeidsflaten. Ansatte som går inn i sterilrommet, bør bruke steriliserte klær og hatter.
For tiden finnes det hovedsakelig sterile rom i mikrobiologifabrikker, mens vanlige laboratorier bruker rene benker. Hovedfunksjonen til en rene benk er å bruke en laminær luftstrømningsenhet for å fjerne diverse små støvpartikler, inkludert mikroorganismer, på arbeidsflaten. Den elektriske enheten lar luft passere gjennom et HEPA-filter og deretter inn i arbeidsflaten, slik at arbeidsflaten alltid holdes under kontroll av den strømmende sterile luften. Dessuten er det en høyhastighetsluftgardin på siden nær utsiden for å forhindre at ekstern bakteriell luft kommer inn.
På steder med vanskelige forhold kan sterile trebokser også brukes i stedet for en ren benk. Sterilboksen har en enkel struktur og er lett å flytte. Det er to hull på forsiden av boksen, som er blokkert med push-pull-dører når den ikke er i bruk. Du kan strekke armene inn under drift. Den øvre delen av fronten er utstyrt med glass for å lette intern drift. Det er en ultrafiolett lampe inni boksen, og redskaper og bakterier kan legges inn gjennom en liten dør på siden.
Aseptiske operasjonsteknikker spiller for tiden ikke bare en sentral rolle i mikrobiologisk forskning og anvendelser, men er også mye brukt i mange bioteknologier. For eksempel transgen teknologi, monoklonal antistoffteknologi, osv.
Publisert: 06.03.2024