Det er to hovedkilder til forurensning i renrom: partikler og mikroorganismer, som kan være forårsaket av menneskelige og miljømessige faktorer, eller relaterte aktiviteter i prosessen. Til tross for best mulig innsats, vil forurensning fortsatt trenge inn i renrom. Spesifikke vanlige forurensningsbærere inkluderer menneskekropper (celler, hår), miljøfaktorer som støv, røyk, tåke eller utstyr (laboratorieutstyr, rengjøringsutstyr), og uriktige tørketeknikker og rengjøringsmetoder.
Den vanligste smittebæreren er mennesker. Selv med de strengeste klærne og de strengeste driftsprosedyrene, er feiltrente operatører den største trusselen om forurensning i renrom. Ansatte som ikke følger retningslinjene for renrom er en høyrisikofaktor. Så lenge en ansatt gjør en feil eller glemmer et trinn, vil det føre til forurensning av hele renrommet. Selskapet kan kun sikre rensligheten i renrommet ved kontinuerlig overvåking og kontinuerlig oppdatering av opplæring med null kontamineringsgrad.
Andre store forurensningskilder er verktøy og utstyr. Hvis en vogn eller en maskin bare tørkes grovt før den går inn i renrom, kan den bringe inn mikroorganismer. Ofte er arbeidere uvitende om at utstyr med hjul ruller over forurensede overflater når det skyves inn i renrommet. Overflater (inkludert gulv, vegger, utstyr, etc.) testes rutinemessig for levedyktige tellinger ved bruk av spesialdesignede kontaktplater som inneholder vekstmedier som Trypticase Soy Agar (TSA) og Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA er et vekstmedium designet for bakterier, og SDA er et vekstmedium designet for muggsopp og gjær. TSA og SDA inkuberes vanligvis ved forskjellige temperaturer, med TSA utsatt for temperaturer i området 30-35˚C, som er den optimale veksttemperaturen for de fleste bakterier. 20-25˚C-området er optimalt for de fleste mugg- og gjærarter.
Luftstrøm var en gang en vanlig årsak til forurensning, men dagens renroms HVAC-systemer har praktisk talt eliminert luftforurensning. Luften i renrom kontrolleres og overvåkes regelmessig (f.eks. daglig, ukentlig, kvartalsvis) for partikkeltellinger, levedyktige tellinger, temperatur og fuktighet. HEPA-filtre brukes til å kontrollere partikkelantallet i luften og har evnen til å filtrere ut partikler ned til 0,2µm. Disse filtrene holdes vanligvis i gang kontinuerlig med en kalibrert strømningshastighet for å opprettholde luftkvaliteten i rommet. Fuktigheten holdes vanligvis på et lavt nivå for å forhindre spredning av mikroorganismer som bakterier og mugg som foretrekker fuktige omgivelser.
Faktisk er det høyeste nivået og den vanligste kilden til forurensning i renrom operatøren.
Kildene og inngangsveiene for forurensning varierer ikke vesentlig fra bransje til bransje, men det er forskjeller mellom bransjer når det gjelder tolerable og utålelige nivåer av forurensning. For eksempel trenger ikke produsenter av svelgbare tabletter å opprettholde samme nivå av renslighet som produsenter av injiserbare midler som er direkte introdusert i menneskekroppen.
Farmasøytiske produsenter har lavere toleranse for mikrobiell forurensning enn høyteknologiske elektroniske produsenter. Halvlederprodusenter som produserer mikroskopiske produkter kan ikke akseptere partikkelforurensning for å sikre produktets funksjonalitet. Derfor er disse selskapene kun bekymret for steriliteten til produktet som skal implanteres i menneskekroppen og funksjonaliteten til brikken eller mobiltelefonen. De er relativt mindre bekymret for mugg, sopp eller andre former for mikrobiell forurensning i renrom. På den annen side er farmasøytiske selskaper bekymret for alle levende og døde kilder til forurensning.
Den farmasøytiske industrien er regulert av FDA og må strengt følge Good Manufacturing Practices (GMP) forskrifter fordi konsekvensene av forurensning i farmasøytisk industri er svært skadelige. Ikke bare må legemiddelprodusenter sørge for at produktene deres er fri for bakterier, de er også pålagt å ha dokumentasjon og sporing av alt. Et høyteknologisk utstyrsselskap kan sende en bærbar PC eller TV så lenge den består internrevisjonen. Men det er ikke så enkelt for farmasøytisk industri, derfor er det avgjørende for en bedrift å ha, bruke og dokumentere driftsprosedyrer for renrom. På grunn av kostnadshensyn leier mange bedrifter inn eksterne profesjonelle renholdstjenester for å utføre renholdstjenester.
Et omfattende miljøtestingsprogram for renrom bør inkludere synlige og usynlige luftbårne partikler. Selv om det ikke er noe krav om at alle forurensninger i disse kontrollerte miljøene skal identifiseres av mikroorganismer. Miljøkontrollprogrammet bør inkludere et passende nivå av bakteriell identifikasjon av prøveekstrakter. Det er mange metoder for bakterieidentifikasjon tilgjengelig for tiden.
Det første trinnet i bakteriell identifikasjon, spesielt når det kommer til renromsisolering, er Gram-fargemetoden, siden den kan gi tolkende ledetråder til kilden til mikrobiell forurensning. Hvis den mikrobielle isolasjonen og identifiseringen viser grampositive kokker, kan forurensningen ha kommet fra mennesker. Hvis den mikrobielle isolasjonen og identifiseringen viser Gram-positive staver, kan forurensningen ha kommet fra støv eller desinfeksjonsbestandige stammer. Hvis den mikrobielle isolasjonen og identifiseringen viser gramnegative staver, kan forurensningskilden ha kommet fra vann eller en hvilken som helst våt overflate.
Mikrobiell identifikasjon i farmasøytiske renrom er svært nødvendig fordi det er relatert til mange aspekter av kvalitetssikring, som for eksempel bioassays i produksjonsmiljøer; bakteriell identifikasjon testing av sluttprodukter; ikke navngitte organismer i sterile produkter og vann; kvalitetskontroll av fermenteringslagringsteknologi i bioteknologiindustrien; og verifisering av mikrobiell testing under validering. FDAs metode for å bekrefte at bakterier kan overleve i et spesifikt miljø vil bli mer og mer vanlig. Når mikrobielle kontaminasjonsnivåer overstiger det spesifiserte nivået eller sterilitetstestresultater indikerer forurensning, er det nødvendig å verifisere effektiviteten til rengjørings- og desinfeksjonsmidler og eliminere identifisering av kontaminasjonskilder.
Det er to metoder for å overvåke renroms miljøoverflater:
1. Kontaktplater
Disse spesielle kulturskålene inneholder sterilt vekstmedium, som er forberedt til å være høyere enn kanten på fatet. Kontaktplatedekselet dekker overflaten som skal prøves, og eventuelle mikroorganismer som er synlige på overflaten vil feste seg til agaroverflaten og inkubere. Denne teknikken kan vise antall mikroorganismer som er synlige på en overflate.
2. Vaskeprøvemetode
Denne er steril og oppbevares i en passende steril væske. Pinnen påføres testoverflaten og mikroorganismen identifiseres ved å gjenvinne vattpinnen i mediet. Vatter brukes ofte på ujevne overflater eller i områder som er vanskelige å prøve med en kontaktplate. Vaskeprøvetaking er mer en kvalitativ test.
Innleggstid: 21. oktober 2024